壓力蒸汽滅菌效果評價方法與標準

1、主題內容與適用范圍

 本方法規定了壓力蒸汽滅菌技術標準及其評價滅菌效果的檢測方法。

 本方法適用于對壓力蒸汽滅菌設備滅菌效果的評價。

2 、試劑

 本標準所用試劑，凡未說明規格者，均為分析純（AR)，水為蒸餾水。

2.1 蛋白陳。

2.2 葡萄糖。

2.3 嗅甲酚紫酒精溶液：取澳甲酚紫2.0g，溶于100mL95％乙醇中。

2.4 澳甲酚紫蛋白陳水培養基配制：蛋白臟 10. 0g,葡萄糖 5. 0g，溶于 1000mL蒸餾水中，調 pH值至7. 0-7. 2，然后再加 2%澳甲酚紫酒精溶液 0. 6mL，搖勻后，按 5mL／管，分裝包口，置壓力蒸汽滅菌器中，于 115 C滅菌 40min后備用。

3、指示菌

 嗜熱脂肪桿菌芽胞(ATCC 7953或 SSI K31）菌片，含菌量為5 X 10'-5X 106 cfu／片，121 C下，殺滅90％微生物所需時間 D12，值為 1. 3-1. 9min，殺滅時間（KT值）為夏19min，存活時間（ST值）為）3. 9min。

4、化學指示劑

 需用衛生部批準的化學指示劑。

5、技術要求

6、檢測方法

6.1 生物學指標（用作壓力蒸汽滅菌設備滅菌效果的依據）。

6.1.1 將嗜熱脂肪桿菌芽胞菌片兩個分別放入滅菌小紙袋 內，置于標準試驗包中心部位。

6.1.2 滅菌柜室內，上、中層中央和排氣口處各放置一個標準試驗包（由 3件平紋長袖手術衣，4塊小手術巾，2塊中手術巾，1塊大手術巾，30塊 10cm X 10cm, 8層紗布敷料包裹成 25cm X 30cm X 30cm大?。?。手提壓力蒸汽滅菌器用通氣貯物盒（22cm X 13cm X 6cm）代替標準試驗包，盒內盛滿中試管，指示菌片放于中心部位兩只滅菌試管內（試管口用滅菌牛皮紙包封），將盒平放于手提壓力蒸汽滅菌器底部。

6.1.3 經一個滅菌周期后，在無菌條件下，取出標準試驗包或通氣貯物盒中的指示菌片，投入澳甲酚紫葡萄糖蛋白陳水培養基中，56℃培養 48h，觀察培養基顏色變化。

6.2 化學指標

在物品包外用化學指示膠帶 ，可作為物品是否經過滅菌的處理標志。在物品包 內中心部位用化學指示劑，可作為物品是否滅菌的參考標志。

7、結果判定及評價

7.1 同次檢測中，標準試驗包或通氣貯物盒內，每個指示菌片接種的澳甲酚紫蛋白陳水培養基全部不變色，判定為滅菌合格。指示菌片之一接種的澳甲酚紫蛋白陳水培養基由紫色變為黃色時，判定為滅菌不合格。

7.2 化學指示劑的顏色變為與滅菌合格標準色相同時，或熔化時作為滅菌合格的參考標準。