壓力蒸汽滅菌效果評價方法與標準
壓力蒸汽滅菌效果評價方法與標準
1、主題內容與適用范圍
本方法規定了壓力蒸汽滅菌技術標準及其評價滅菌效果的檢測方法。
本方法適用于對壓力蒸汽滅菌設備滅菌效果的評價。
2 、試劑
本標準所用試劑,凡未說明規格者,均為分析純(AR),水為蒸餾水。
2.1 蛋白陳。
2.2 葡萄糖。
2.3 嗅甲酚紫酒精溶液:取澳甲酚紫2.0g,溶于100mL95%乙醇中。
2.4 澳甲酚紫蛋白陳水培養基配制:蛋白臟 10. 0g,葡萄糖 5. 0g,溶于 1000mL蒸餾水中,調 pH值至7. 0-7. 2,然后再加 2%澳甲酚紫酒精溶液 0. 6mL,搖勻后,按 5mL/管,分裝包口,置壓力蒸汽滅菌器中,于 115 C滅菌 40min后備用。
3、指示菌
嗜熱脂肪桿菌芽胞(ATCC 7953或 SSI K31)菌片,含菌量為5 X 10'-5X 106 cfu/片,121 C下,殺滅90%微生物所需時間 D12,值為 1. 3-1. 9min,殺滅時間(KT值)為夏19min,存活時間(ST值)為)3. 9min。
4、化學指示劑
需用衛生部批準的化學指示劑。
5、技術要求
壓力蒸汽滅菌器 | 壓力MPa/cm2 | 溫度℃ | 滅菌時間min |
下排氣式 | 0.070 | 115 | 40 |
0.105 | 121 | 30 | |
預真空 | 0.210 | 134 | 4~6 |
6、檢測方法
6.1 生物學指標(用作壓力蒸汽滅菌設備滅菌效果的依據)。
6.1.1 將嗜熱脂肪桿菌芽胞菌片兩個分別放入滅菌小紙袋 內,置于標準試驗包中心部位。
6.1.2 滅菌柜室內,上、中層中央和排氣口處各放置一個標準試驗包(由 3件平紋長袖手術衣,4塊小手術巾,2塊中手術巾,1塊大手術巾,30塊 10cm X 10cm, 8層紗布敷料包裹成 25cm X 30cm X 30cm大?。?。手提壓力蒸汽滅菌器用通氣貯物盒(22cm X 13cm X 6cm)代替標準試驗包,盒內盛滿中試管,指示菌片放于中心部位兩只滅菌試管內(試管口用滅菌牛皮紙包封),將盒平放于手提壓力蒸汽滅菌器底部。
6.1.3 經一個滅菌周期后,在無菌條件下,取出標準試驗包或通氣貯物盒中的指示菌片,投入澳甲酚紫葡萄糖蛋白陳水培養基中,56℃培養 48h,觀察培養基顏色變化。
6.2 化學指標
在物品包外用化學指示膠帶 ,可作為物品是否經過滅菌的處理標志。在物品包 內中心部位用化學指示劑,可作為物品是否滅菌的參考標志。
7、結果判定及評價
7.1 同次檢測中,標準試驗包或通氣貯物盒內,每個指示菌片接種的澳甲酚紫蛋白陳水培養基全部不變色,判定為滅菌合格。指示菌片之一接種的澳甲酚紫蛋白陳水培養基由紫色變為黃色時,判定為滅菌不合格。
7.2 化學指示劑的顏色變為與滅菌合格標準色相同時,或熔化時作為滅菌合格的參考標準。